阴道毛滴虫RRas基因的cDNA克隆和原核表达

• 作者: 傅玉才 张丽芳 许铭炎 许锦阶
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阴道毛滴虫 RRas基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1257-1259
• 页数: 3页
• 分类号: R382.21
• 字数: 2433字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.12.006

摘要

目的 克隆和表达阴道毛滴虫Rras(TvRRas)基因,以便进一步探讨其组织定位及功能.方法 应用PCR方法从构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增TvRRas基因片段,克隆至pGEM-T载体,经PCR、酶切和测序鉴定后亚克隆至原核表达载体pET-41a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍-硝基三乙酸(Ni-NTA)柱纯化表达产物后用SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析鉴定.结果 从阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增的TvRRas基因片段长522 bp,酶切及DNA测序证实pET-41a/TvRRas重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为45 000 u.结论 成功构建重组原核表达质粒pET-41a/TvRRas,并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅玉才	汕头大学医学院寄生虫学教研室	115	556	12.0	18.0
2	许锦阶	汕头大学医学院寄生虫学教研室	39	184	8.0	12.0
3	许铭炎	汕头大学医学院寄生虫学教研室	45	154	5.0	10.0
4	张丽芳	汕头大学医学院寄生虫学教研室	3	7	2.0	2.0