重组pDC316-MCMV/hNIS真核表达质粒的构建及在肿瘤细胞的功能

• 作者: 周嘉嘉 周泉波 唐启彬 李志花 陈汝福 陈积圣
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人钠/碘同向转运体 逆转录聚合酶链反应 基因转染 碘放射性同位素
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 383-386,407
• 页数: 5页
• 分类号: R736.1
• 字数: 3768字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2007.04.005

摘要

[目的]克隆人的钠/碘同向转运体(hNIS)基因可编码序列,并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达.[方法]利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(又称Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pDC316载体上,获得重组真核表达质粒载体pDC316-MCMV/hNIS.采用脂质体转染的方法,把pDC316-MCMV/hNIS重组质粒(实验组)或pDC316空质粒(对照组)分别导入到胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和卵巢癌细胞株SK-OV-3细胞,转染后48 h采用RT-PCR方法检测转染细胞内的hNIS mRNA水平,转染后第2、3、4天分别检测肿瘤细胞对125I的吸收功能.[结果]序列分析结果证实克隆片段与文献报道的hNIS基因cDNA序列完全一致.实验组转染后48 h,在CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞及SK-OV-3细胞内均能检测到hNIS mRNA高水平表达,对照组基本无hNIS mRNA表达.转染后第3天细胞吸碘达到高峰,实验组CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和SK-OV-3细胞对125I的吸收量分别比对照组高24倍、17倍和13倍.[结论]从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染肿瘤细胞后,能使肿瘤细胞发挥高水平吸碘功能,为进一步运用放射性核素体内靶向治疗非甲状腺肿瘤奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李志花	中山大学附属第二医院肝胆外科	44	243	8.0	13.0
2	陈汝福	中山大学附属第二医院肝胆外科	159	583	14.0	18.0
3	周嘉嘉	中山大学附属第二医院肝胆外科	40	203	6.0	13.0
4	周泉波	中山大学附属第二医院肝胆外科	65	252	8.0	11.0
5	陈积圣	中山大学附属第二医院肝胆外科	122	861	16.0	22.0
6	唐启彬	中山大学附属第二医院肝胆外科	32	173	8.0	12.0