赤霉毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)酶联免疫检测方法研究

• 作者: 史建荣 徐剑宏 李华 王裕中 祭芳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 免疫学检测 ELISA 小麦赤霉病
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 721-726
• 页数: 6页
• 分类号: S4
• 字数: 4964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.04.010

摘要

[目的]建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法,以保证麦类作物的安全生产以及谷物食品的安全性.[方法]以主要赤霉病菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为对象,利用半琥珀酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇的牛血清蛋白偶联物(3-HS-DON-BSA)作免疫原,分别采用腹膜腔注射法和颈、背部多点注射法免疫Balb/c小鼠和豚鼠,获得DON 的多抗血清,建立间接ELISA检测方法.[结果]多抗豚鼠血清的效价达到1∶6 400,而小鼠混合血清的效价则为1∶12 800.引起DON抗体最大结合50%抑制时,所需DON及其类似物3-Ac-DON和T-2毒素的量分别为 63μg·ml-1、114μg·ml-1和＞1 000μg·ml-1;相对交叉反应率分别为 100%,55.2%和6.3%.包被抗原的最适工作浓度为1/1 500,小鼠血清工作浓度为1/1 600.在包被原和小鼠血清的最适工作浓度下,20%以上的甲醇稀释度对DON免疫分析有显著的影响,低于10%浓度的甲醇对DON免疫分析基本无影响.建立的间接竞争ELISA法检测范围为0.01～100μg·ml-1,检出限为0.02μg·ml-1,平均回收率为82%～93%,精密度(CV%)为4.65%～21.3%.[结论]本文提出的毒素检测方法,检测成本低,方便易行,不仅可以应用于小麦赤霉病的病理学研究,也可广泛应用于谷物及其制成品中DON毒素的含量检测,具有较好的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祭芳	江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所	10	105	6.0	10.0
2	徐剑宏	江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所	18	224	10.0	14.0
3	史建荣	江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所	20	354	11.0	18.0
4	王裕中	江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所	15	297	9.0	15.0
5	李华	江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所	3	58	3.0	3.0