荞麦胰蛋白酶抑制剂的原核表达及纯化

• 作者: 张政 李晨 李玉英 王转花
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 荞麦 胰蛋白酶抑制剂 表达 抑制活性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4025.2007.01.003

摘要

根据文献报道的荞麦胰蛋白酶抑制剂的氨基酸序列及本研究室先前已获得的部分基因序列设计引物,经过RT-PCR扩增,获得荞麦胰蛋白酶抑制剂编码区基因全序列.将该基因克隆到原核表达载体pQE-31中,并转化至大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达获得可溶性目的蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的25%.该目的蛋白经Ni2+-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE分析显示,在大约9 kD处出现明显的目的条带,与预计蛋白分子量大小一致.Western blot鉴定证实,目的蛋白N端带有6个组氨酸标签.活性测定表明,目的蛋白具有专一性的胰蛋白酶抑制剂活性,抑制活性约为77 U/mg纯化蛋白.本实验为进一步研究荞麦胰蛋白酶抑制剂结构与功能的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉英		1	11	1.0	1.0
2	张政		1	11	1.0	1.0
3	李晨		1	11	1.0	1.0
4	王转花		1	11	1.0	1.0