携带人生存素基因短发夹RNA表达载体重组腺病毒的构建及其生物学作用

• 作者: 李莉萍 梁念慈 王润秀 覃燕梅 谢富华
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生存素 基因表达调控,病毒 DNA,重组
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 463-469
• 页数: 7页
• 分类号: R965.2
• 字数: 5429字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2008.06.012

摘要

目的 构建携带人生存素(survivin)基因短发夹RNA(shRNA)表达载体的重组腺病毒.方法 构建并筛选重组质粒pShuttle-survivin,将其与腺病毒骨架质粒共转染HEK-293细胞,经同源重组产生腺病毒;PCR鉴定并测定病毒滴度;β-半乳糖染色检测病毒对人乳腺癌细胞MCF-7的感染效率;流式细胞术、RT-PCR和Western免疫印迹法检测其生物学功能.结果 经PCR鉴定重组腺病毒构建成功;48 h后感染率达75%以上;腺病毒感染MCF-7细胞后48 h,生存素mRNA和蛋白的表达均受到抑制;腺病毒感染MCF-7细胞后,细胞分裂受阻于G2/M 期,在48和72 h有凋亡峰出现.结论 成功构建人生存素基因shRNA表达载体的重组腺病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李莉萍	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	10	23	3.0	4.0
2	梁念慈	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	252	1946	22.0	32.0
3	王润秀	赣南医学院第一附属医院肾内科	26	55	4.0	6.0
4	谢富华	赣南医学院生物化学与分子生物学教研室	9	18	2.0	3.0
8	覃燕梅	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	40	378	10.0	19.0