黑曲霉W3350脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的表达

• 作者: 周丽娜 张鹭 杨剑芳 王晓娟 路福平
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: RT-PCR 黑曲霉 脯氨酰内肽酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-17
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2802字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建pET-PEP重组原核表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法:采用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillusniger)W3350中扩增出脯氨酰内肽酶(PEP)的基因,插入表达载体pEr-22b(+),经EcoRI和HindⅢ双酶切和DNA序列测定验证,将正确的重组质粒转入大肠杆茵BL21(DE3)中,IPTG(终浓度1 mmol/L)诱导获得表达.结果:表达产物进行超声破碎,经SDS-PAGE电泳检测,PEP分子质量大约为57kDa,与理论值相符,通过酶活方法测定脯氨酰内肽酶酶活为0.656U/ml,约是出发菌株的5倍.结论:首次成功构建表达载体pEr-PEP并在原核细胞中表达,为进一步研究PEP的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路福平	天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院	42	314	10.0	14.0
2	周丽娜	天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院	11	40	3.0	5.0
4	张鹭	齐齐哈尔大学生命科学与工程学院	26	189	9.0	12.0
5	王晓娟	天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院	3	7	2.0	2.0