IL-1ra-Fcε融合分子的构建及其在293T细胞中的表达与鉴定

• 作者: 刘中成 徐东刚 王嘉玺 王园园 邹民吉
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: IL-1ra-Fcε融合基因 转染 真核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 312-315
• 页数: 4页
• 分类号: Q753
• 字数: 4115字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2008.04.004

摘要

目的:构建IL-1ra-Fcε融合基因的真核表达载体pCI-neo-IL-1ra- Fcε,研究其在体外的表达情况.方法:利用RT-PCR方法从哮喘大鼠脾细胞中克隆大鼠IgE 恒定区cDNA,同时从载体pBV220-IL-1ra中克隆IL-1ra基因.利用重叠延伸PCR技术合成了IL-1ra-Fcε融合基因.将其克隆入真核表达载体pCI-neo,以脂质体法转染293T细胞,G418筛选稳定表达细胞株.利用Western印迹、RT-PCR验证融合蛋白的表达,并在EL-4/CTLL-2细胞中对融合蛋白活性进行了验证.结果和结论:成功构建了pCI-neo-IL-1ra- Fcε表达载体,Western 印迹、RT-PCR验证融合蛋白在293T细胞得到表达,并获得了稳定表达IL-1ra- Fcε的细胞株.表达的融合蛋白在体外具有拮抗IL-1的功能.为过敏性哮喘基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嘉玺	军事医学科学院基础医学研究所	57	335	9.0	16.0
2	邹民吉	军事医学科学院基础医学研究所	39	238	6.0	14.0
3	徐东刚	军事医学科学院基础医学研究所	75	421	10.0	17.0
4	刘中成	军事医学科学院基础医学研究所	22	150	4.0	12.0
6	王园园	军事医学科学院基础医学研究所	15	161	5.0	12.0