人DC-SIGN的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化和鉴定

• 作者: 周从良 孙平 曹晓春 曾洁 章晓联
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: DC-SIGN 蛋白的纯化 Western blot
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 427-429,446
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8852.2008.04.002

摘要

目的:获得纯化的DC-SIGN蛋白,为揭示DC-SIGN参与抗原提呈的机制,探讨宿主细胞DC-SIGN蛋白和HIV、HCV、结核杆菌等病原体的相互作用机制奠定基础.方法:人DC-SIGN的cDNA克隆到pGEX-KG表达载体上,转化入E.coli中,通过IPTG诱导,过度表达GST-DC-SIGN融合蛋白,并使用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析柱提取得到纯化的DC-SIGN蛋白,最后通过SDS-PAGE和Western Blot方法进行检测和鉴定. 结果:酶切鉴定证实DC-SIGN基因已插入原核表达载体pGEX-KG.重组表达质粒pGEX-KG-DC-SIGN在大肠杆菌BL21中成功表达了DC-SIGN融合蛋白,其分子质量约为44 kU.结论:成功构建DC-SIGN原核表达重组质粒,并提取纯化出DC-SIGN原核蛋白,为下一步研究DC-SIGN的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾洁	武汉大学基础医学院免疫学系	9	37	3.0	6.0
5	周从良	武汉大学基础医学院免疫学系	1	0	0.0	0.0
6	孙平	武汉大学基础医学院免疫学系	16	48	4.0	6.0
7	曹晓春	武汉大学基础医学院免疫学系	9	19	2.0	4.0
8	章晓联	武汉大学基础医学院免疫学系	50	234	8.0	13.0