HIV-1 Vif蛋白的体内表达及其生物学功能

• 作者: 于湘晖 孔维 张文艳
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人免疫缺陷病毒1型 Vif蛋白 体内表达 生物学功能
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 737-740
• 页数: 4页
• 分类号: R373|QTS6
• 字数: 3019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.09.001

摘要

目的 分别构建带有6His和mbp tag的HIV-1 Vif基因真核表达载体,在体内表达融合蛋白,并检测其生物学功能.方法 PCR扩增带有6His和mbp tag的HIV-1 Vif基因,克隆至真核表达载体VRl012上.将抗病毒因子APOBEC3G(A3G)分别与空载体VR1012、HIV-1野生型Vif/VR1012、Vif-mbp/VR1012和Vif-6His/VR1012共同转染293T细胞,检测Vif-mbp和Vif-6His的表达,并进行A3G体内降解试验.将A3G和/或可产生病毒的质粒HXB2Neo △ Aif分别与HIV-1野生型Vif/VR1012、Vif-mbp/VR1012和Vif-6His/VR1012共同转染293T细胞,通过A3G包装进病毒和Magi细胞感染试验,进一步检测HIV-1 Vif-mbp和Vif-6His融合蛋白的生物学功能.结果 重组表达质粒Vif-mbp/VR1012和Vif-6His/VR1012经双酶切鉴定证明构建正确.转染293T细胞48 h后,Vif-mbp和Vif-6His融合蛋白均有表达,但表达的Vff-mbp有不同程度的降解.Vif-6His可降解A3G,使其表达量下降至10%左右,而Vif-mbp几乎不能降解A3G.Vif-6His可阻止A3G包装进病毒颗粒中,而Vif-mbp无此功能.Vif-mbp可使HXB2Neo △ Vif病毒感染能力恢复至15%,而Vif-6His可使其恢复至86%.结论 已成功构建了带有6His和mbp tag的HIV-1 Vif基因真核表达载体,表达的Vif-mbp融合蛋白影响了Vif的生物学功能,但Vif-6His融合蛋白不影响Vif的生物学功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔维	吉林大学生命科学学院	51	126	6.0	8.0
2	于湘晖	吉林大学生命科学学院	35	51	3.0	5.0
3	张文艳	吉林大学生命科学学院	8	13	3.0	3.0