金鱼生长素Ⅰ基因的原核表达及其多克隆抗体制备

• 作者: 张国广 盖永锋 陈亮 陈元婷
• 来源期刊: 厦门大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: gfGHⅠ基因 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2008,（z2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2008.z2.005

摘要

鱼生长激素(Fish growth hormone, fGH)是鱼类脑垂体中分泌的促进生长的单一亚基的蛋白激素.它参与鱼的生长代谢,能够加速蛋白质合成和脂类降解等生理功能,具有增强食欲、提高饲料转化率的作用.用引入酶切位点BamHⅠ和NotⅠ的引物,以质粒pBluescript SK-gfGHⅠ为模板,PCR扩增获得了gfGHⅠ编码区序列,分别定向插入原核表达载体pET-28a中,构建了原核表达载体pET28a-gfGHⅠ,pET28a-gfGHⅠ转化大肠杆菌BL21(DE3),在1.0 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导下,表达出融合蛋白(His)6 tag-gfGHⅠ,该蛋白分子量大约为26 ku;经MALDI-TOF-MS以及抗HIS抗体的Western blotting鉴定,该融合蛋白即为表达的目的蛋白;经超声破碎鉴定该蛋白为包涵体形式存在,用连续超声破碎的方法,回收该蛋白纯度可达85.1%,免疫小鼠,间接ELISA法检测抗体效价为1∶ 1 600.该抗体的获得为gfGHⅠ基因在酵母和水稻中的异源表达及功能鉴定奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈亮	厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室	99	718	14.0	22.0
2	张国广	厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室	26	146	8.0	11.0
6	陈元婷	厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室	2	4	2.0	2.0
7	盖永锋	厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0