pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达

• 作者: 王占祥 王海东 程鹏 谭国伟 马永会 骆启聪
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: pygo2基因C6细胞 载体 真核表达 wnt信号
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 299-302
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R739.4
• 字数: 3468字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2008.03.005

摘要

目的 构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达.方法 从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的 片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5a,LB平板筛选菌落,提取质粒.重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达.结果 重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRI,HindⅢ酶切分析及测序检查,表明真核表达载体构建正确;瞬时转染C6细胞后,免疫细胞荧光染色及蛋白印迹检测表明转染细胞能够表达外源Pygo2基因.结论 成功构建了pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并能够在真核细胞中进行表达,这为今后研究pygo2基因在胶质瘤中的作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王海东	厦门市第一医院神经外科	5	14	2.0	3.0
2	马永会	厦门市第一医院神经外科	3	12	2.0	3.0
3	谭国伟	厦门市第一医院神经外科	5	27	3.0	5.0
4	王占祥	厦门市第一医院神经外科	3	12	2.0	3.0
5	程鹏	厦门大学生命科学院发育与肿瘤细胞实验室	4	2	1.0	1.0
6	骆启聪	厦门大学生命科学院发育与肿瘤细胞实验室	2	5	1.0	2.0