微小RNA miR-26a的克隆及其慢病毒表达载体的构建

• 作者: 姚开泰 揭荣荣 王爽 鲁娟
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hsa-miR-26a 肿瘤 慢病毒
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 426-428
• 页数: 4页
• 分类号: R739.6
• 字数: 2627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.05.007

摘要

目的 克隆微小RNA hsa-miR-26a并构建其慢病毒表达载体.方法 将PCR扩增得到的miR-26a前体序列和pIVTHM载体经双酶切后连接产生pIVTHM-miR-26a慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pIVTHM-miR-26a、psPAχ2和pMD2.G 3质粒共转染包装细胞293FT,包装产生慢病毒.以293FT细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-26a的慢病毒表达载体pIVTHM-miR-26a.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光,并测得病毒滴度为5×105TU/ml.成功构建hsa-miR-26a的慢病毒表达载体.为深入研究miR-26a的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚开泰	南方医科大学肿瘤研究所	65	406	11.0	16.0
2	王爽	南方医科大学病理学教研室	23	136	7.0	10.0
3	揭荣荣	南方医科大学中医药学院	2	3	1.0	1.0
4	鲁娟	南方医科大学肿瘤研究所	15	69	4.0	8.0