大鼠微小RNA miR-16的克隆及其慢病毒表达载体的构建

• 作者: 李定国 潘勤 虢灿杰
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: rno-miR-16 miRNA 慢病毒 载体构建与表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 401-405
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.05.006

摘要

目的 克隆微小RNA rno-miR-16,构建其慢病毒表达载体pLV-miR-16并包装成慢病毒颗粒,为进一步研究miR-16的功能奠定了实验基础.方法 从大鼠细胞基因组中用PCR 的方法扩增miR-16 的前体,构建了miR-16的重组表达载体pLV-miR-16,脂质体法将重组慢病毒载体和包装质粒混合物(pPACK-GAG、pPACK-REV和pVSV)共转染包装细胞293TN细胞,包装产生慢病毒,以293TN细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度.结果 经PCR扩增检测阳性菌落和测序证实,成功构建携带大鼠miR-16基因重组慢病毒载体.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293TN呈绿色荧光,并测得108＞ifu/ml.结论 成功构建大鼠慢病毒载体pLV-miR-16,为深入研究rno-miR-16的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李定国	上海交通大学医学院附属新华医院消化科	118	745	15.0	21.0
2	虢灿杰	上海交通大学医学院附属新华医院消化科	16	52	4.0	6.0
3	潘勤	上海交通大学医学院附属新华医院消化科	22	105	6.0	9.0