人源Fank1蛋白质FN3结构域多肽的原核表达,纯化及晶体筛选

• 作者: 宋伟 王琳芳 缪时英 黄海涛
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Fank1 FN3结构域 表达 蛋白质纯化 晶体生长
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 193-196
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.002

摘要

目的 纯化人源Fank 1(fibronectin typeⅢ and ankyrin repeat domain 1)蛋白质N端FN3(fibronectin typeⅢ,Ⅲ型纤黏连蛋白)结构域蛋白,用于晶体生长的三维结构分析.方法 将FN3结构域基因片段克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,将菌落PCR和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3)后获得表达菌株.该菌株经IPTG诱导高效表达出带有GST标签的可溶性的融合蛋白,经过Glutathione SepharoseTM4B亲和层析、Hiload 16/60 superdex200分子筛层析纯化后,蛋白纯度达到95 %以上.结果 纯化蛋白采用悬滴气相扩散法得到棒状晶体.结论 成功制备了高纯度FN3蛋白,获得FN3蛋白质晶体,为进一步的三维结构解析及Fank 1功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪时英	中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	15	26	3.0	4.0
2	王琳芳	中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	13	9	2.0	2.0
3	宋伟	中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	22	179	7.0	13.0
4	黄海涛	中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	1	1	1.0	1.0