重组鼠IL-28的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 严玉兰 刘洋 步雪峰 袁利学 郑金旭
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素-28 大肠埃希菌 蛋白质纯化 抗体制备
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 472-474,479
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 2925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2009.06.004

摘要

目的: 获取重组鼠IL-28(mIL-28)纯化蛋白,制备多克隆抗体.方法: 用PCR技术扩增鼠IL-28成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-30,构建融合表达载体pET-30a-mIL-28,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达IL-28融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,然后免疫6～8周龄鸡,制备多克隆抗体,采用ELISA 检测抗体效价.结果: 成功构建了表达载体pET-30a-mIL-28,DNA序列测定结果与预期结果一致.在37℃培养条件下,IPTG诱导表达的IL-28融合蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,发现其与融合蛋白的理论计算值一致,免疫鸡后收获抗血清, ELISA 显示抗体效价具有高度特异性.结论: 获得了重组鼠IL-28纯化蛋白,制备了鼠IL-28多克隆抗体,为进一步深入研究IL-28的生物活性及其应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严玉兰	江苏大学附属人民医院呼吸内科	39	108	5.0	8.0
2	刘洋	江苏大学附属人民医院呼吸内科	45	226	7.0	12.0
3	步雪峰	江苏大学附属人民医院呼吸内科	33	106	6.0	9.0
4	郑金旭	江苏大学临床医学院	86	437	10.0	16.0
5	袁利学	江苏大学临床医学院	3	9	2.0	3.0