溶藻弧菌溶血素基因反向PCR克隆及其原核表达

• 作者: 罗鹏 胡超群
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 溶藻弧菌 溶血素 反向PCR 表达
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 410-416
• 页数: 7页
• 分类号: Q786|S917
• 字数: 5283字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2009.03.008

摘要

溶藻弧菌的胞外产物(ECP)在其致病过程中发挥重要作用,已经观察到溶藻弧菌ECP所致的溶血现象,关于溶藻弧菌溶血素的种类和其对溶藻弧菌的致病性贡献的报道非常稀少.利用已经报道的多种弧茵溶血素基因序列设计通用引物,检测溶血素基因在溶藻弧菌中的分布,发现96个菌株中有74株扩增出溶血素基因(vah)片段.对致病株ZJ0451的vah片段测序.根据已测得的片段序列设计引物,通过反向PCR扩增及后续克隆测序获得全长vah基因及部分侧翼序列.经比对证实溶藻弧菌vah与多种弧菌的TLH类溶血素高度相似,且其肽链N端有信号肽.利用pET32a载体构建了两种包含不同长度融合标签的vah表达载体,并均在大肠杆菌BL21(DE3)中获得可溶性表达.在26℃的诱导温度下,9 h时vah表达量达到相对最大.在原核表达系统中,vah蛋白信号肽可以被切除.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗鹏	中国科学院南海海洋研究所海洋生物资源可持续利用重点实验室广东省应用海洋生物学重点实验室	75	1889	25.0	41.0
2	胡超群	中国科学院南海海洋研究所海洋生物资源可持续利用重点实验室广东省应用海洋生物学重点实验室	74	1368	25.0	34.0