硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达

• 作者: 曹云鹤 李松瑜 王军军 董冰 陈小玲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 组成型表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-14
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2937字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.01.004

摘要

目的:构建硫色曲霉β-甘露聚糖酶的毕赤酵母组成型分泌表达菌株,研究重组菌株的产酶水平.方法:EcoRI/Xba I 双酶切质粒pPIC-mann-opt,琼脂糖凝胶电泳、回收目的基因片段后,与组成型毕赤酵母表达载体pGAPzαA连接,转化大肠杆菌,经筛选获得含有pGAP-mann-opt的重组克隆;提取pGAP-mann-opt,用限制性内切酶BapH I 线性化后,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,进行Zeocin抗性筛选和PCR鉴定.结果:获得了重组菌株,重组菌株在YPD培养基中摇瓶发酵24 h,上清液酶活达到343 U/mL,产酶蛋白约为1.0 mg/mL.结论:构建的硫色曲霉β-甘露聚糖酶组成型表达菌株具有较好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹云鹤	中国农业大学动物营养学国家重点实验室	16	89	6.0	9.0
2	董冰	中国农业大学动物营养学国家重点实验室	11	23	3.0	4.0
3	王军军	中国农业大学动物营养学国家重点实验室	11	52	4.0	7.0
4	陈小玲	中国农业大学动物营养学国家重点实验室	3	38	3.0	3.0
5	李松瑜	中国农业大学动物营养学国家重点实验室	1	6	1.0	1.0