高原鼠兔低氧诱导因子-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 任芳丽 常智杰 李红阁 赵新全
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 高原鼠兔 低氧诱导因子-1α 原核表达 多克隆抗体 免疫印迹 免疫染色
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 198-203
• 页数: 6页
• 分类号: Q7
• 字数: 5829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1050.2009.02.015

摘要

高原鼠兔生活在青藏高原海拔3 000～5 000 m的区域,具有极强的低温、低氧耐受能力.低氧诱导因子-1(HIF-1)是一种由HIF-1α和HIF-1β组成的异源二聚体转录因子,在生物体的低氧适应性调节中起着关键作用.低氧主要通过调节HIF-1α蛋白水平来影响HIF-1α的转录活性.本研究用DNA重组技术将高原鼠兔HIF-1α(pHIF-1α)(538/822)编码基因序列亚克隆至原核表达载体PGEX- 4T-1中,并在大肠杆菌BL21菌株中进行高效诱导表达,获得可溶性表达产物.将纯化后的GST-pHIF-1α(538/822)融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备多克隆抗体.免疫印迹结果表明,制备的抗体能够识别高原鼠兔HIF-1α蛋白.进一步利用亲和纯化的方法对此多克隆抗体进行了纯化.免疫印迹和免疫染色的结果表明,纯化的抗体可以用于检测外源以及内源的高原鼠兔HIF-1α蛋白的表达和定位,为后续的研究提供了重要的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵新全	中国科学院西北高原生物研究所高原生物适应与进化重点实验室	230	5718	40.0	63.0
2	李红阁	中国科学院西北高原生物研究所高原生物适应与进化重点实验室	3	15	1.0	3.0