人溶菌酶基因的原核表达及其生物学活性

• 作者: 吕爽 姜秋杰 欧阳萍 赵瑞利 雷连成 韩文瑜
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人溶菌酶 原核表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 544-547
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 在大肠杆菌中表达人溶菌酶(hLYZ)基因,并检测其生物学活性.方法 将人溶菌酶基因克隆至带有GST融合标签的原核表达载体pGEX-4T-1上,转化大肠杆菌BL21(DE3),终IPTG诱导表达.表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定,并用溶壁微球菌比浊法检测酶活性,热激法检测其生物学活性.结果 经PCR、双酶切鉴定和核苷酸序列测定,表明重组表达质粒pGEX-4T-hLYZ构建正确.SDS-PAGE显示,在相对分子质量约40 000处可见目的蛋白条带,表达量占菌体总蛋白的46.5%,目的蛋白在裂解沉淀中占17.0%,在裂解上清中占58.3%,主要以可溶形式表达.纯化后,重组蛋白纯度可达95%以上,且具有良好的反应原性.重组hLYZ酶活性为2 389 U/mg,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用.结论 已成功地在大肠杆菌中表达了可溶性重组人溶菌酶,且具有较高的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩文瑜	吉林大学畜牧兽医学院	159	1086	16.0	26.0
2	雷连成	吉林大学畜牧兽医学院	131	764	13.0	21.0
3	欧阳萍	吉林大学畜牧兽医学院	7	32	4.0	5.0
4	吕爽	吉林大学畜牧兽医学院	18	97	7.0	8.0
5	赵瑞利	吉林大学畜牧兽医学院	10	50	5.0	6.0
6	姜秋杰		13	15	2.0	3.0