猪Suv39h2基因的cDNA克隆及原核表达

• 作者: 刘丽娜 刘敏 彭健 蒋思文 郑嵘
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 组蛋白赖氨酸甲基转移酶 猪Suv39h2基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 611-616
• 页数: 6页
• 分类号: S828|Q344.13
• 字数: 4219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.05.001

摘要

以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用"电子克隆"获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该莺组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基 B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并用SDS-PAGE电泳进行检测,优化后的最佳条件为IPTG诱导4 h,其浓度为0.7 mmol·L-1,并主要以包涵体的形式存在.Western blotting检测发现在约66 ku处有一条特异带,与预测的大小一致.猪Suv39h2基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础.