结核分枝杆菌esat6-rpfD融合基因的原核表达及产物纯化

• 作者: 何俊杰 康健 张薇 徐志凯 柏银兰 王丽梅
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 esat6-rpfD融合基因 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 479-481
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.04.007

摘要

目的:构建结核分枝杆菌融合基因esat6-rpfD的原核表达载体,表达和纯化ESAT6-RpfD融合蛋白.方法:从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中经PCR分别扩增esat6和rpfD基因,克隆入pMD19-T载体,测序后克隆入原核表达载体pProExHTB,酶切重组质粒,转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达融合蛋白,亲和层析纯化融合蛋白.结果:PCR扩增的esat6、rtfD基因序列与GenBank报道一致;诱导表达后,经SDS-PAGE和Westem blot分析,在相对分子质量约30 000处有目的条带,融合蛋白以包涵体形式表达.结论:构建了esat6-rpfD融合基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达并纯化得到ESAT6-RpfD融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志凯	第四军医大学微生物学教研室	216	1097	15.0	22.0
2	王丽梅	第四军医大学微生物学教研室	57	187	7.0	10.0
3	柏银兰	第四军医大学微生物学教研室	79	325	11.0	13.0
4	张薇	第四军医大学微生物学教研室	69	395	11.0	15.0
5	何俊杰	第四军医大学微生物学教研室	8	19	3.0	4.0
6	康健	第四军医大学微生物学教研室	31	84	5.0	7.0