自噬相关基因Atg5的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 师长宏 张彩勤 张海 栗文彬 白冰 缪珊 赵勇
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: Atg5 原核表达 自噬 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 482-484
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 2861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.04.008

摘要

目的:克隆自噬相关基因Atg5,在大肠杆菌中重组表达后制备抗Atg5多克隆抗体.方法:用RT-PCR方法从RAW264.7细胞基因组中克隆Atg5基因,连接至pQE80L原核表达载体后转化大肠杆菌DH5a进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot鉴定表达蛋白;目的蛋白纯化后,以100 P4g/kg纯化的蛋白免疫新西兰兔,制备抗Atg5多克隆抗体;提取RAW264.7细胞总蛋白,以制备的抗Atg5多抗进行Western blot反应,检测多抗的生物学活性.结果:克隆了Atg5基因,在大肠杆菌中表达了重组Atg5,SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子质量与预期值一致,Western blot结果证明该产物具有较高的生物学活性,纯化蛋白免疫动物后制备了抗Atg5多克隆抗体.结论:在大肠杆菌中表达了重组Atg5,制备了抗Atg5多克隆抗体,为自噬的检测和研究提供了工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师长宏	第四军医大学实验动物中心	145	694	13.0	16.0
2	张海	第四军医大学实验动物中心	87	511	12.0	18.0
3	赵勇	第四军医大学实验动物中心	74	352	10.0	14.0
4	栗文彬	第四军医大学实验动物中心	25	153	7.0	11.0
5	白冰	第四军医大学实验动物中心	35	127	6.0	9.0
6	缪珊	第四军医大学药物研究所	71	495	12.0	18.0
7	张彩勤	第四军医大学实验动物中心	42	102	5.0	7.0