GST-P58IPK融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

• 作者: 丁壮 丛彦龙 关振宏 张茂林 段铭
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 融合蛋白 GST-P58IPK 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 1023-1027
• 页数: 5页
• 分类号: S852.23
• 字数: 3910字
• 语种: 中文

摘要

以RT-PCR方法扩增目的基因P58IPK,将其克隆至原核表达质粒pGEX-6p-1.将所构建的pGEX-6p-1-P58IPK重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并诱导表达,利用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和柱进行纯化,所得产物进行SDS-PAGE、Western-blot及体外活性鉴定.结果显示,大肠杆菌细胞经诱导表达出相对分子质量约为85 000的蛋白,与GST-P58IPK融合蛋白大小相符;Western-blot显示该融合蛋白能够被抗GST的抗体特异性识别,磷酸化试验表明GST-P58IPK融合蛋白能够抑制PKR的体外磷酸化.结果表明,在大肠杆菌表迭系统中表达了有活性的GST-P58IPK融合蛋白,为PKR信号通路的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁壮	吉林大学畜牧兽医学院	122	583	13.0	18.0
2	丛彦龙	吉林大学畜牧兽医学院	41	191	6.0	13.0
3	段铭	吉林大学人兽共患病研究所教育部人兽共患病重点实验室	12	22	3.0	3.0
4	张茂林	吉林大学人兽共患病研究所教育部人兽共患病重点实验室	14	38	4.0	5.0
5	关振宏	吉林大学人兽共患病研究所教育部人兽共患病重点实验室	13	32	3.0	4.0