一种骨桥蛋白小分子肽的原核表达与生物学活性鉴定

• 作者: 刘颖慧 温进坤 田文嘉 郑斌 韩梅
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨桥蛋白 OPN13肽 原核表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 848-852
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.05.004

摘要

目的:用大肠杆菌(E.coli)表达骨桥蛋白13肽(OPN 13),经亲和层析纯化后检测其生物学活性.方法:运用基因重组技术,将骨桥蛋白分子中含黏附序列的13肽cDNA片段与携带His编码序列的原核表达载体连接构建融合蛋白表达质粒pET-32c-OPN13.将重组质粒转化E.coli DH 5α宿主菌后,对诱导融合蛋白表达的条件进行优化.表达产物His-OPN13经Ni-NTA His Bind Resin金属离子螯合层析纯化后,分别检测其对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移的影响.结果:所表达的His-OPN13融合蛋白在宿主菌中以胞浆可溶性的形式存在.经亲和层析可得到高纯度的His-OPN13融合蛋白.产物活性分析表明,His-OPN13融合蛋白能特异性地抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞的黏附和迁移.结论:OPN13肽可在大肠杆菌中高效表达,并可剂量依赖性地抑制血管平滑肌细胞黏附和迁移活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩梅	河北医科大学生物化学与分子生物学研究室	156	1751	23.0	35.0
2	温进坤	河北医科大学生物化学与分子生物学研究室	148	2066	26.0	38.0
3	田文嘉	河北医科大学生物化学与分子生物学研究室	3	19	2.0	3.0
4	郑斌	河北医科大学生物化学与分子生物学研究室	31	232	8.0	14.0
5	刘颖慧	河北医科大学生物化学与分子生物学研究室	1	2	1.0	1.0