幽门螺杆菌GGT基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 周武松 唐炜 张尤历 王文兵 陈慧娟
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 γ-谷氨酰转肽酶 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（17）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 1768-1771
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3804字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.17.014

摘要

目的: 克隆幽门螺杆菌( H pylori)γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)基因,实现GGT基因在大肠杆菌中的表达.方法: 从胃癌患者胃黏膜组织中分离培养获得H pylori,提取其基因组DNA,对GGT基因进行PCR扩增,克隆进pMD18-T载体,酶切和测序验证,构建原核表达载体pET-28a(+)-GGT,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot分析检测表达产物.结果: 成功克隆了GGT基因,经酶切和测序验证正确,成功构建了pET-28a(+)-GGT质粒,高效表达出了68 kDa的融合蛋白.结论: 在大肠杆菌中成功表达了GGT重组融合蛋白,为进一步研究GGT与线粒体介导的细胞凋亡之间的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张尤历		122	578	12.0	17.0
2	王文兵	江苏大学生命科学研究院	108	565	12.0	19.0
3	陈慧娟		24	118	7.0	9.0
4	唐炜		28	88	6.0	7.0
5	周武松	安徽农业大学生命科学研究院	3	16	1.0	3.0