人J链基因的克隆及原核表达研究

• 作者: 安黎云 时兰春 李玮 王宪灵 王缚鲲 贾克然
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: J链 逆转录PCR 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2764-2767
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 2881字
• 语种: 中文

摘要

目的 用基因工程技术在大肠埃希菌中表达人J链基因重组蛋白,为研究其功能及开发检测J链抗原的试剂盒奠定基础.方法 提取人脾细胞总RNA,以此为模板,通过RT-PCR的方法获得J链基因.将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,构建J链表达载体,测序证实正确后转化至E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,表达产物经免疫印迹法(western blot,WB)鉴定其免疫反应性.结果 测序结果证实笔者成功地获得了J链基因,其序列与GenBank中报道完全一致.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白在Ecoli BL21中获得表达,其相对分子量约为15KD左右,表达的蛋白量约占菌体蛋白的15%.结论 成功克隆了人免疫球蛋白J链基因,并在大肠杆菌中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	时兰春		12	37	3.0	5.0
2	安黎云		17	124	5.0	10.0
3	李玮		28	252	7.0	15.0
4	王宪灵		16	74	3.0	8.0
5	王缚鲲		28	155	5.0	12.0
6	贾克然		11	14	3.0	3.0