SEDL基因及其突变体真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 周鑫 夏欣一 姚兵 崔英霞 戈一峰 李晓军 魏莉 黄宇烽
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SEDL基因 绿色荧光表达载体 迟发性脊柱骨骺发育不良
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 分子、生化遗传学与PCR技术
• 页码范围: 7-9,35
• 页数: 4页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的 构建SEDL基因及其突变体与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体的融合表达质粒pEGFP-C3-SEDL并获得表达.方法 分别提取X连锁迟发性脊柱骨骺发育不良(SEDT)患者和正常对照外周血淋巴细胞RNA,RT-PCR方法扩增SEDL基因cDNA,双酶切后克隆至pEGFP-C3空载体,构建表达质粒pEGFP-C3-SEDL.双酶切和DNA测序鉴定后,转染COS-7细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察重组蛋白表达情况.结果 DNA测序显示重组真核表达载体pEGFP-C3-SEDL构建成功,SEDL基因c.370-371ins A突变位点被成功克隆到突变体重组质粒中.荧光倒置显微镜观察证实重组质粒均能在细胞内进行蛋白表达.结论 SEDL基因及其突变体真核表达载体的成功构建为其进一步研究SEDL基因突变致SEDT的分子机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏欣一		65	332	10.0	15.0
2	李晓军		109	618	13.0	19.0
3	黄宇烽		254	2755	26.0	39.0
4	崔英霞		74	401	11.0	16.0
5	姚兵		79	493	12.0	16.0
6	戈一峰		22	156	6.0	12.0
7	周鑫		10	22	4.0	4.0
8	魏莉		4	18	2.0	4.0