海州香薷金属硫蛋白(EhMT1)的原核表达和纯化及其多克隆抗体的制备

• 作者: 夏妍 张红生 沈振国 王娟 王桂萍
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 金属硫蛋白 原核表达 融合蛋白 抗血清
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 25-30
• 分类号: Q78|Q81
• 字数: 4758字
• 语种: 中文

摘要

为研究耐铜植物海州香薷的金属硫蛋白(EhMT1)的结构与功能,运用分子生物学方法构建了pGEX-2T-EhMT1重组表达载体,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后表达得到大小为33×103左右的融合蛋白GST-EhMT1,与预期结果一致.对融合蛋白诱导表达的温度、时间、IPTG诱导浓度等条件进行了优化,成功构建了能大量表达可溶性GST-EhMT1的优良原核表达体系.诱导表达的融合蛋白经GST-Sepharose亲和层析纯化后,每升菌液获得的可溶性融合蛋白高达70 mg.用纯化的融合蛋白免疫新西兰雄兔,制备的抗血清经间接ELISA检测到较高的多克隆抗体效价.蛋白质印迹结果显示,纯化的蛋白质与兔抗血清可以特异性结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈振国	南京农业大学生命科学学院	87	2873	33.0	52.0
2	张红生	南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室	124	2049	24.0	40.0
3	王娟	南京农业大学生命科学学院	25	323	9.0	17.0
4	夏妍	南京农业大学生命科学学院	11	66	4.0	7.0
5	王桂萍	南京农业大学生命科学学院	14	365	8.0	14.0