大豆异黄酮组分HPLC快速分析技术及其在豆腐加工中的应用

• 作者: 王春娥 盖钧镒 赵团结
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 大豆 异黄酮组分 高效液相色谱(HPLC) 梯度洗脱 豆乳 豆腐
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 2062-2072
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2010.02062

摘要

大豆异黄酮育种与大豆制品加工研究需要进行大批量样品12种异黄酮组分的快速定量分析.在前人研究基础上利用Agilent 1100高效液相色谱(HPLC)系统,以大豆品种南农95C-13为材料,研究大豆苷元、大豆苷、乙酰基大豆苷、丙二酰基大豆苷、染料木苷元、染料木苷、乙酰基染料木苷、丙二酰基染料木苷、黄豆苷元、黄豆苷、乙酰基黄豆苷、丙二酰基黄豆苷等12种标准品外标法快速定量技术.从样品制备与色谱条件对分析12种异黄酮组分的准确度和分离度人手,确定分析流程,以(科丰1号×南农1138-2)的184个重组自交系(NJRIKY)为材料,研究豆腐加工中总量和各组分的变化特点.(1)样品以80%甲醇水溶液50℃超声1 h提取;色谱条件为,检测波长254 nm,柱温36℃,流速2.0 mL min-1,进样量10 μL,流动相0.1%(V/V)乙酸水溶液(A)和100%甲醇(B),0～2 min,27%B(V/V)→2～3 min,27%～38%B→3～10 min,38%B→10～12 min,38%～39%B→12～14 min,39%B→14～15 min,39～27%B梯度洗脱;在15 min内将12个组分良好分离,各组分峰面积与其相应浓度均呈良好线性关系(R2为0.9976～0.9999);加标回收率均大于99%,变异系数低于2%.(2)NJRIKY群体籽粒、豆乳、豆腐异黄酮总量和组分的大量分析验证了HPLC快速技术的效果.籽粒异黄酮总含量(3 695.00 μg g-1)在豆乳加工中平均85.15%转入豆乳(3 146.12 μg g-1),14.85%(548.88 μg g-1)进入豆渣.传统豆腐加工通过硫酸钙絮凝,只有17.32%(639.89 μg g-1)转入豆腐,67.83%(2 506.23μg g-1)留在黄浆水中.豆乳中12种组分含量比籽粒中稍低,均以丙酰基染料木苷含量最高;而豆腐中乙酰基染料木苷和乙酰基黄豆苷缺失,以染料木苷元与大豆苷元含量较高.大豆科丰1号与南农1138-2杂交重组后家系间的异黄酮遗传变异增大,增加了对其遗传改良的潜力.