大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达

• 作者: 何兴新 易亮衡 朱丹丹 段义农 秦永伟 陈金铃
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠源肺孢子菌 p55基因 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: R382.9
• 字数: 3158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.01.007

摘要

目的 构建大鼠源肺孢子菌抗原p55 基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达.方法 以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR 扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T 载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR 检测其基因转录情况,SDS-PAGE 鉴定其表达相应的目的蛋白质情况.结果 成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR 和SDS-PAGE 方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质.结论 成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7 细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦永伟	南通大学医学院寄生虫学教研室	20	77	6.0	7.0
2	陈金铃	南通大学医学院寄生虫学教研室	31	94	6.0	7.0
3	段义农	南通大学医学院寄生虫学教研室	44	104	6.0	7.0
4	朱丹丹	南通大学医学院寄生虫学教研室	26	68	5.0	6.0
5	易亮衡	南通大学医学院寄生虫学教研室	4	16	3.0	4.0
7	何兴新	南通大学医学院寄生虫学教研室	9	14	3.0	3.0