荧光标记脂肪酶的固定化及其稳定性

• 作者: 宋锡瑾 张驰 徐佳音 王杰
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 脂肪酶 固定化 稳定性 荧光光谱 构象
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 100-107
• 语种: 中文

摘要

将标记有荧光探针FITC(异硫氰基荧光素)的脂肪酶固定化,通过测定活性和荧光光谱,探究各种因素对固定化后荧光标记脂肪酶性质的影响,并分析活性,构象和荧光光谱三者之间的联系.研究结果表明:在固定化脂肪酶过程中,聚乙二醇400二丙烯酸酯能形成合理的网格结构,使酶活较高;配体诱导酶的催化构象,使酶活性提高到未诱导酶的2倍以上;配体抽提能使脂肪酶活性中心得到释放从而提高催化活力.固定化脂肪酶的稳定性大大提高,在90℃、强酸强碱下固定化酶仍保有原酶70%、60%以上的活性;用盐酸胍、脲等溶解变性剂浸泡15 d后,酶活性仍然可以保持初始活性的70%以上.荧光光谱能较好地反映脂肪酶的活性和构象变化,最适pH和温度下脂肪酶的荧光强度最低,在溶解变性剂中,荧光强度随时间延长而逐渐降低,这表明不同条件下脂肪酶构象经历的去折叠过程不同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王杰	浙江大学化学系	93	429	13.0	18.0
2	宋锡瑾	浙江大学化学工程与生物工程学系	23	307	11.0	17.0
3	张驰	浙江大学化学工程与生物工程学系	12	45	4.0	6.0
4	徐佳音	浙江大学化学工程与生物工程学系	3	3	1.0	1.0