密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆及其表达条件的优化

• 作者: 华霄 张文斌 杨瑞金 王贺 蒋孝燕 钱婷婷
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 密苏里游动放线菌 葡萄糖异构酶 表达 Slowdown PCR
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 171-176
• 分类号: Q786
• 字数: 5984字
• 语种: 中文

摘要

为克隆、表达密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶(GI)基因xylA,并对其诱导表达条件进行初步优化.采用SlowdownPCR方法克隆得到密苏里游动放线菌(Actinoplanes missouriensis)CICIM B0118(A)的葡萄糖异构酶基因xylA,构建pET-28a(+)-xylA表达载体,并转化至E.coli BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对其表达产物进行SDS-PAGE电泳.结果表明,融合蛋白分子质量约为45kD.在诱导时间9h、0.6mmol/L IPTG、30℃和OD600nm值为0.8的最适培养条件下,酶比活力最高达到62.42U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞金	江南大学食品学院	170	1963	23.0	35.0
2	华霄	江南大学食品学院	67	411	11.0	16.0
3	张文斌	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	87	710	15.0	21.0
4	王贺	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	6	34	3.0	5.0
8	蒋孝燕	江南大学食品学院	4	9	2.0	3.0
9	钱婷婷	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	4	29	3.0	4.0