异源基因α1,3半乳糖转移酶与增强型绿色荧光蛋白融合对荧光蛋白表达的影响

• 作者: 刘祖国 卓慧钦 唐晶 姚琴 李鹏飞 谢柏臻 赵永祥 赵涣阁
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞杂志（电子版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 α1,3半乳糖转移酶 融合蛋白 荧光强度
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 9-13
• 分类号: Q78
• 字数: 2876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2011.02.002

摘要

目的 研究异源(猪)基因α1,3半乳糖转移酶(3GT)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因形成的融合蛋白对其荧光表达量的影响.方法 BamHI,EcoRI酶切pcDNA3.1-α1,3GT重组载体后,回收含α1,3GT的片段,与BamHI、EcoRI酶切回收的pEGFP-N1载体连接,并酶切、测序鉴定重组真核表达载体pEGFP/α1,3GT.将该表达载体转染人肺癌细胞A549、人胚肾细胞293FT,EGFP的表达用荧光显微镜观察和流式细胞仪进行荧光定量分析.结果 pEGFP-N1载体转染A549和293FT后48 h的转染阳性率分别80.5％和86.5％；pEGFP/α1,3GT载体转染A549和293FT细胞后48 h的转染效率则为75.8％和81.2％.A549细胞空白对照,转染pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的A549细胞平均荧光强度分别为1.21、0.956;293FT细胞空白对照,pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的293FT细胞平均荧光表达量分别为7.66、1.00.结论 pEGFP/α1,3GT融合蛋白的生成抑制了绿色荧光蛋白的表达强度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘祖国	厦门大学眼科研究所	43	681	8.0	25.0
2	李鹏飞	湖南省株洲市第一医院肿瘤科	7	4	1.0	1.0
3	卓慧钦		8	24	3.0	4.0
4	谢柏臻		10	37	3.0	6.0
5	姚琴		3	2	1.0	1.0
6	赵永祥		8	50	3.0	7.0
7	唐晶	湖南省株洲市第一医院肿瘤科	1	1	1.0	1.0
8	赵涣阁	海南医学院省热带病重点实验室	1	1	1.0	1.0