蛋白Ⅲ-α-银环蛇毒素融合蛋白表达质粒的构建及表达

• 作者: 周丽君 张海荣 曲佳 王欲晓 高荣凯
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: α-银环蛇毒素 SIP技术 重组融合蛋白质类
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1162-1164,1173
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 构建适合选择感染性噬菌体( Selectively infective phage,SIP)技术筛选的蛋白Ⅲ-α银环蛇毒素(α-Bungarotoxins,α-BTXs)融合蛋白表达质粒.方法 从银环蛇毒腺中提取总RNA,RT-PCR扩增α-BTXs基因,插入表达载体pTTMIN,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导表达.经SDS-PAGE、Western blot及竞争抑制ELISA法检测融合蛋白的表达.结果 获得的α-BTXs基因序列与相关报道完全一致；融合蛋白表达质粒构建正确；融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白的20％,可与抗蛇毒素血清发生特异性反应,且保持了α-BTXs的抗原性.结论 成功构建了蛋白Ⅲ-α-BTXs融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白,为利用SIP技术筛选抗α-BTXs人源抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周丽君	海军总医院中心实验科	37	90	5.0	7.0
2	王欲晓	海军总医院中心实验科	29	62	5.0	5.0
3	高荣凯	海军总医院中心实验科	20	60	5.0	7.0
4	曲佳	海军总医院中心实验科	23	67	5.0	6.0
5	张海荣	海军总医院中心实验科	14	67	4.0	8.0