云南红梨PyMT基因的克隆、原核表达和功能分析

• 作者: 张晓东 李昆志 樊磊 舒群 苏俊 陈丽梅
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 云南红梨 PyMT 序列分析 原核表达 重金属抗性
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 485-492
• 分类号: Q786
• 字数: 6546字
• 语种: 中文

摘要

金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)是一种在生物中普遍存在的多功能蛋白.根据云红梨1号光特异性差减文库中获得的PyMT (Pyrus pyrifolia metallothionein)基因序列,PCR扩增4种红梨PyMT的基因组序列并进行序列分析；通过RT-PCR方法从云红梨1号果皮中扩增出PyMT基因,并将其命名为PyMTl (Pyrus pyrifolia metallothionein 1).构建原核表达载体pGEX-4T- 1-PyMT1,在E.coli BL21中进行表达；通过在液体培养基中添加不同浓度的重金属离子,检测转化菌和对照菌的的生长曲线,分析PyMT1的功能.序列分析表明,PyMT1是典型的Metallothion 2.PyMT1氨基酸序列系统发育分析表明,PyMT1与MdMT亲缘关系最近.SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期的大小一致；生长曲线结果表明工程菌对重金属离子Zn、Cu、Cd具有一定的耐受性.这些结果为进一步纯化、鉴定目的蛋白和研究其结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽梅	昆明理工大学生物工程技术研究中心	99	642	14.0	18.0
2	李昆志	昆明理工大学生物工程技术研究中心	73	471	13.0	16.0
3	苏俊	云南省农业科学院园艺科学研究所	25	126	4.0	10.0
4	舒群	云南省农业科学院园艺科学研究所	33	192	6.0	13.0
5	樊磊	昆明理工大学生物工程技术研究中心	1	0	0.0	0.0
6	张晓东	昆明理工大学生物工程技术研究中心	9	18	2.0	4.0