pSIREN-survivin/shRNA表达载体的构建与鉴定

• 作者: 刘流 孙瑞梅 李晓江 杨洁 赵留芳 隋军 马静
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 瘢痕疙瘩 RNA干扰 质粒 Survivin 短发卡BNA
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 507-511
• 分类号: R619.6
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pSIREN-survivin/shRNA重组质粒并鉴定,为探索瘢痕疙瘩基因治疗的RNA干扰(RNAi)途径奠定基础.方法 根据基因库survivin cDNA序列及Reynolds设计原则,设计并合成两端有酶切位点的65个碱基的寡核苷酸链,退火成互补双链后用T4DNA酶克隆至线性化的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中;转化大肠杆菌DH-5a菌株,提取质粒行酶切鉴定,测序分析.结果 PCR扩增片断出现465 bp大小的目的 基因条带与预期结果相符;双酶切见约65 bp目的 基因条带;插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致.结论 成功构建重组质粒pSIREN-survivin/shRNA,为下一步用脂质体转染瘢痕或肿瘤细胞的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马静	昆明医学院第三附属医院头颈外科	34	202	8.0	13.0
2	李晓江	昆明医学院第三附属医院头颈外科	59	352	10.0	16.0
3	孙瑞梅	昆明医学院第三附属医院头颈外科	7	34	4.0	5.0
4	刘流	昆明医学院第一附属医院口腔颌面外科	135	593	11.0	19.0
5	杨洁	昆明医学院第三附属医院头颈外科	12	17	2.0	3.0
6	赵留芳	昆明医学院第三附属医院头颈外科	2	5	1.0	2.0