耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及其酶学特性

• 作者: 吕文平 娄在祥 孙军涛 戴易兴 王洪新 马朝阳
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 工学
• 关键词: β-1,3-1,4-葡聚糖酶 克隆 表达 纯化 酶学特性
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·质量安全
• 页码范围: 878-882
• 分类号: TQ925+.9
• 字数: 3787字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.04.033

摘要

为了获得耐热的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,利用PCR技术从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)中扩增β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bgl),构建重组表达质粒pET30a-bgl转化至大肠杆菌BL21( DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷酸(IPTG)诱导表达获得重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶,并对纯化后的β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行酶学特性研究.结果表明,摇瓶培养的重组基因工程菌的酶活力为80 U/ml,纯化后酶的比活力为4 969 U/mg,是纯化前的54.6倍；酶的分子量为2.6×104左右,最适温度为50℃,最适pH为6.0,在pH 5.0和pH 8.0之间有很好的稳定性,90℃下酶的半衰期(t1/2)为21 min；该酶对燕麦葡聚糖和地衣多糖有很好的专一性.重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶有较好的耐酸、耐热性,在酿造和饲料加工过程中能够保持较高的活性,具有很好的工业应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙军涛	江南大学食品学院	7	32	3.0	5.0
2	王洪新	江南大学食品学院	140	1529	22.0	30.0
6	吕文平	江南大学食品学院	23	90	5.0	8.0
7	马朝阳	江南大学食品学院	31	205	9.0	13.0
8	娄在祥	江南大学食品学院	33	247	10.0	13.0
9	戴易兴	江南大学食品学院	7	16	3.0	3.0