突触小体相关蛋白SNAP25的原核表达、纯化及鉴定

• 作者: 安佳佳 张惟材 汪建华 熊向华 韦娜
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 突触小体相关蛋白(SNAP25) 基因克隆 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 192-195
• 分类号: Q78
• 字数: 2801字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.02.010

摘要

目的:克隆突触小体相关蛋白(SNAP25)基因,原核表达、纯化并鉴定SNAP25蛋白.方法:PCR扩增SNAP25基因,克隆至表达质粒pTIG-Trx,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE及Western印迹分析肉毒神经毒素BoNT/A轻链对该蛋白的裂解情况.结果:构建了pTIG-SNAP25表达质粒,经IPTG诱导表达,目的蛋白占全菌蛋白的26.2%,表达形式为可溶性表达,表达量达115.4mg/L,纯化后蛋白纯度达95%以上;经SDS-PAGE及Western印迹分析,SNAP25蛋白可被BoNT/A轻链特异降解.结论:克隆了SNAP25基因,在原核系统中表达、纯化并鉴定了重组SNAP25蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
2	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
3	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
4	韦娜	军事医学科学院生物工程研究所	4	2	1.0	1.0
5	安佳佳	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0