黄曲霉毒素B1人工抗原及鼠源多克隆抗血清的制备

• 作者: 刘庆堂 孙亚宁 王磊 职爱民 胡骁飞 邓瑞广
• 来源期刊: 食品科技
• 学科: 工学
• 关键词: 黄曲霉毒素B1 免疫原制备 合成 多抗血清 ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测篇
• 页码范围: 277-281
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.4
• 语种: 中文

摘要

目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清.方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原AFB1-BSA和包被抗原AFB1-OVA,采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫实验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定.结果:结果表明半抗原AFB1分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;免疫的6只小鼠效价均达1×10-4以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50% inhibitive concentration,IC50为8.199 ng/mL.结论:实验成功合成了AFB1人工浪原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗体血清,为AFB1单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制莫定了坚实的基础.