结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp16.3的表达、纯化及鉴定

• 作者: 吴芳 姚楠 张万江 徐芳 田玺泽 章乐 董江涛
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Hsp16.3 蛋白表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R378.911
• 语种: 中文

摘要

目的 构建结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3原核表达载体,获得Hsp16.3蛋白,并进行纯化及鉴定.方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增Hsp16.3基因,以pET28a为载体,构建重组质粒pET28a-Hsp16.3,测序正确后,转入宿主菌BL21 (DE3)进行诱导表达.融合蛋白经SDS-PAGE,Western blot分析鉴定,并通过镍柱进行亲和层析纯化,表达蛋白分子质量约17 ku,能被结核杆菌16 ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别. 结果 成功构建了Hsp16.3原核表达载体pET28a-Hsp16.3,并在宿主菌BL21 (DE3)中表达,表达蛋白分子质量单位约17 ku,能被结核杆菌16 ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别. 结论 Hsp16.3基因克隆入宿主菌中并成功表达,纯化Hsp16.3蛋白具有生物学活性,为Hsp16.3的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐芳		8	30	2.0	5.0
2	张万江		40	57	5.0	6.0
3	董江涛		20	52	4.0	7.0
4	吴芳		33	154	5.0	12.0
5	姚楠		5	6	1.0	2.0
6	章乐		25	18	3.0	3.0
7	田玺泽		3	0	0.0	0.0