hPSF蛋白的原核表达质粒的构建及分析鉴定

• 作者: 夏乾峰 李灵
• 来源期刊: 海南医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PSF蛋白 肿瘤 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1353-1356
• 页数: 4页
• 分类号: Q754
• 字数: 2526字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建hPSF蛋白原核表达质粒,在体外观察其与GAGE6调控区结合现象.方法:从人成纤维细胞中提取总RNA,利用hPSF特异性引物通过RT-PCR方法扩增hPSF cDNA编码序列,克隆入pET-28a载体中,构建重组载体pET-28-hPSF.将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达,通过SDS-PAGE和免疫印迹法对表达产物进行鉴定.结果:酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功；SDS-PAGE分析在相对分子质量约100 kD处出现了1条蛋白条带,免疫印迹结果显示,所构建的重组载体可在大肠杆菌中高效表达hPSF蛋白.结论:成功构建了hPSF原核表达载体,并能够在大肠埃希菌中有效表达hPSF,为进一步研究hPSF的生物学作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏乾峰	海南医学院热带医学与检验医学院	23	157	7.0	12.0
2	李灵	海南医学院科学实验中心	5	3	1.0	1.0