GDDR位点突变载体的构建和稳转细胞系的建立

• 作者: 双剑博 方诚 杜建军 王飞 祁胜宾 赵占伟 韩亚楠
• 来源期刊: 中华普外科手术学杂志（电子版）
• 关键词: 遗传载体 细胞系 肿瘤 点突变 转染
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-280
• 页数: 7页
• 字数: 4094字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-3946.2012.03.051

摘要

目的 构建GDDR位点突变载体,使GDDR翻译蛋白无法通过二硫键与TFF1结合,建立稳定转染GDDR位点突变载体的人胃癌SGC-7901稳转细胞系.方法 设计GDDR Cys38位点突变引物,构建GDDR位点突变的真核表达载体;脂质体法转染重组质粒至人胃癌细胞系SGC-7901;G418筛选阳性细胞并扩大培养;实时定量 PCR检测突变GDDR mRNA在人胃癌细胞系SGC-7901的表达.结果 经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列; 实时定量 PCR证实突变GDDR在人胃癌SGC-7901稳转细胞系高表达.结论 GDDR定点突变载体构建成功,建立了稳定转染GDDR位点突变载体的SGC-7901细胞系,为进一步研究GDDR的结构和功能提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜建军	第四军医大学西京消化病医院消化外科	23	156	7.0	12.0
2	双剑博	第四军医大学西京消化病医院消化外科	12	140	7.0	11.0
3	祁胜宾	第四军医大学西京消化病医院消化外科	4	78	3.0	4.0
4	方诚	第四军医大学西京消化病医院消化外科	11	100	4.0	10.0
5	赵占伟	第四军医大学西京消化病医院消化外科	8	37	3.0	6.0
6	王飞	第四军医大学西京消化病医院消化外科	7	40	2.0	6.0
7	韩亚楠	第四军医大学西京消化病医院消化外科	4	35	3.0	4.0