人凋亡相关新基因PNAS-4的克隆、原核表达与纯化

• 作者: 戴谦 曹康 李磊 林超 汤明海 袁铸 谢意 雷庭钧
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: PNAS-4 蛋白表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 503-506
• 分类号: R394
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆人的凋亡相关新基因PNAS4到原核表达载体,表达并纯化人的PNAS-4蛋白.方法 用RT-PCR的方法从人肺腺癌A549细胞中扩增出人的PNAS4基因.将其克隆到pGEX-6P-1载体,转化到大肠杆菌BL21.用IPTG诱导表达,并用亲和层析的方法纯化出人的PNAS-4蛋白;然后使用质谱分析鉴定纯化后的蛋白质.结果 扩增出的人PNAS4基因与GenBank上的序列完全一致.纯化的人PNAS-4融合蛋白在相对分子质量约50×103处可见特异性条带;经质谱鉴定证实所纯化的蛋白质为PNAS-4融合蛋白.结论 成功表达和纯化了人PNAS-4蛋白,为今后对人PNAS-4基因的功能研究打下基础.