人miR-139高效真核表达载体的构建及其功能初探

• 作者: 叶丙雨 张乐之 张彦 李德彬 肖丽霞 赵志虎 赵玉军
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: miR-139 真核表达载体 qRT-PCR ZR75-1 癌基因
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 40-43
• 分类号: R737.9
• 字数: 3631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2012.01.011

摘要

目的 构建人miR-139高效真核表达载体,初步探究miR-139在乳腺癌ZR75-1细胞中的功能.方法 设计成熟miR-139的PCR引物,扩增包含miR-139成熟序列的基因组序列.将扩增产物亚克隆到真核表达载体PIRES2-EGFP(IE)上,构建miR-139真核表达载体IE-139.将IE-139转染至乳腺癌ZR75-1细胞中,通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-139的表达情况,同时检测过表达miR-139的乳腺癌ZR75-1细胞中癌基因c-Myc、EIF4G2和ZBTB34的mRNA水平.结果 酶切、测序结果表明,人miR-139真核表达载体构建成功;qRT-PCR表明,miR-139能在乳腺癌ZR75-1细胞中高效表达(P<0.01),过表达miR-139的乳腺癌ZR75-1细胞中c-Myc和EIF4G2的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),但ZBTB34的下降水平不明显.结论 成功构建了人miR-139真核表达载体IE-139,通过qRT-PCR检测,证明该载体能成功实现miR-139的高效过表达,并且miR-139能明显抑制乳腺癌ZR75-1细胞中癌基因c-Myc和EIF4G2的mRNA表达水平,这为进一步研究miR-139的功能及调控靶基因的分子机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵玉军	沈阳农业大学畜牧兽医学院	141	677	13.0	20.0
2	赵志虎	军事医学科学院生物工程研究所	48	447	11.0	20.0
3	张彦	军事医学科学院生物工程研究所	21	110	6.0	10.0
4	肖丽霞	沈阳农业大学畜牧兽医学院	2	5	1.0	2.0
5	李德彬	军事医学科学院生物工程研究所	3	7	2.0	2.0
6	叶丙雨	军事医学科学院生物工程研究所	4	3	1.0	1.0
7	张乐之	沈阳农业大学畜牧兽医学院	2	7	1.0	2.0