棉花GhCOMT1基因原核表达载体构建及蛋白纯化和 Western 鉴定

• 作者: 倪志勇 李晓东 李波 范玲
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: GhCOMT1 原核表达 蛋白纯化 Western blotting
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1971-1976
• 页数: 6页
• 分类号: Q785
• 字数: 4368字
• 语种: 中文

摘要

为进一步研究GhCOMT1基因的功能,构建了原核表达载体pET-28a-GhCOMT1,酶切鉴定并测序后转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中,在0.2 mmol/L IPTG浓度条件下分别进行不同温度梯度诱导,用蛋白标记亲和层析柱( His TrapTM HP)对重组蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达产物.结果表明:16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达,其中16℃诱导12 h的蛋白表达量最大；SDS-PAGE检测目的蛋白相对分子量约为39.748 kD; Western blotting分析表明,目的蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪志勇	新疆农业科学院核技术生物技术研究所	59	287	9.0	14.0
2	范玲	新疆农业科学院核技术生物技术研究所	43	483	12.0	20.0
3	李波	新疆农业科学院核技术生物技术研究所	29	214	8.0	14.0
4	李晓东	新疆农业科学院核技术生物技术研究所	4	14	2.0	3.0