人ULBP1重组蛋白的克隆表达和多克隆抗体制备

• 作者: 施良 毛朝明 牟笑 蒋茜
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: UL16结合蛋白1 重组蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 1300-1302
• 分类号: R593.2|R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的:表达人UL16结合蛋白l(ULBP1)胞外段重组蛋白,并制备兔抗人ULBP1多克隆抗体.方法:利用RT-PCR技术获得人ULBP1分子胞外段的基因编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-ULBP1.测序鉴定正确后转化入大肠杆菌感受态细胞M15,经IPTG 30℃诱导4h后,对表达产物进行鉴定.用镍柱对人ULBP1重组蛋白进行纯化,并将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔,采用流式细胞术(FCM)、Western blot法对制备的多克隆抗体进行生物学鉴定.结果:成功构建了原核表达载体pQE30-ULBP1(aa81～244),并获得了高纯度的人pQE30-ULBP1 (aa81～244)重组蛋白.制备的多克隆抗体能够识别肺癌细胞株A549表面表达的天然构象ULBP1分子.结论:成功表达了人ULBP1(aa81～244)重组蛋白并成功制备了兔抗人ULBP1的多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施良	江苏大学附属医院核医学科	16	83	6.0	8.0
2	毛朝明	江苏大学附属医院免疫学重点实验室	60	187	7.0	9.0
6	蒋茜	江苏大学附属医院免疫学重点实验室	29	119	6.0	9.0
7	牟笑	江苏大学附属医院核医学科	13	39	4.0	6.0