用P.pastoris表达L-阿拉伯糖异构酶及其酶活性分析

• 作者: 崔艳艳 张爱联 陈丽萍
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: L-阿拉伯糖异构酶 毕赤酵母 基因表达 酶活性 D-塔格糖
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2013.01.010

摘要

目的:用毕赤酵母表达L-阿拉伯糖异构酶.方法:用PCR法扩增大肠杆菌的L-阿拉伯糖异构酶基因,构建含L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-ai.通过电转法将pPIC9K-ai转化毕赤酵母GS115基因组.先筛选出高G418抗性的克隆,然后再从高拷贝的克隆中筛选出高表达重组L-阿拉伯糖异构酶的重组子作为工程菌GS115(pPIC9K-ai).结果:在甲醇诱导下,摇瓶发酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌表达L-阿拉伯糖异构酶32 mg/L.结论:毕赤酵母表达的L-阿拉伯糖异构酶具有转化D-半乳糖为D-塔格糖的生物活性.每升GS115(pPIC9K-ai)发酵液能转化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张爱联	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	15	39	4.0	5.0
2	陈丽萍	海南大学农学院	1	0	0.0	0.0
3	崔艳艳	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	2	2	1.0	1.0