苍白芽孢杆菌D-阿拉伯糖异构酶克隆表达及D-塔格糖制备

• 作者: 张娥 张梁 石贵阳
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 苍白芽孢杆菌 D-阿拉伯糖异构酶 D-塔格糖 表达 转化
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 121-126
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 6625字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201309026

摘要

目的:利用筛选出的一株能产D-阿拉伯糖异构酶(D-AI)的耐热菌株,将D-半乳糖转化为D-塔格糖.方法:从实验室保藏的菌株中筛选出一个产D-阿拉伯糖异构酶能力较强的苍白芽孢杆菌,将该菌株中的D-阿拉伯糖异构酶基因D-AI克隆到载体pET-28a上,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达.通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性蛋白.结果:D-阿拉伯糖异构酶纯化酶的最适反应pH值和温度分别是7.0和60℃,在pH6.0～8.0范围和30～70℃范围内具有较好的稳定性.加入Mn2+、Zn2+、Fe2+、Ca2+和Ba2+均能够使D-塔格糖的转化率提高,而Mg2+和Cu2+则对酶活力产生不同程度的抑制.结果表明:底物质量浓度为18g/L的D-半乳糖(含5mmol/L Mn2+),加入到pH值为7.0的重组细胞粗酶液中,在60℃条件下反应12h,可达到最高转化率为41.6％.结论:这表明具有生物活性的重组D-AI大肠杆菌E.coli(BL21)中成功表达且具备工业化生产D-塔格糖的潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张梁		8	43	5.0	6.0
2	石贵阳		7	28	4.0	5.0
3	张娥		1	0	0.0	0.0