ANKIB1的克隆、原核表达和纯化

• 作者: 刘世饶 杨子善 解博红 谢云飞 马振玲
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: ANKIB1基因 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 189-194
• 语种: 中文

摘要

含锚蛋白重复序列和IBR结构域蛋白1(ANKIB1)含有RING-IBR-RING结构域、ANK模体和泛素结合模体,可能具有E3泛素连接酶活性和特殊的催化机制,但其功能目前所知甚少.采用巢式PCR技术分段扩增了人ANKIB1基因的cDNA,并通过基因重组构建了全长ANKIB1基因的完整编码序列.将ANKIB1连接到原核表达载体pGEX-5X-3中,用于表达GST-ANKIB1融合蛋白.在含有RING型蛋白稳定剂ZnCl2的培养基中,转化pGEX-5X-ANKIB1的大肠杆菌BL21(DE3)经过0.1 mmol/L IPTG在15℃低温条件下诱导10h,成功表达了分子量高达148.5 kD的可溶性GST-ANKIB1蛋白.利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析,纯化了GST-ANKIB1融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	解博红	新乡医学院基础医学院	9	24	3.0	4.0