结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒的构建、原核表达及纯化

• 作者: 丁淑琴 朱佳佳 杨园园 杨风琴
• 来源期刊: 宁夏医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分支杆菌 CFP10 重组质粒 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 390-392,前插1
• 页数: 4页
• 分类号: R378.911
• 字数: 2086字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建结核分支杆菌重组CFP10/ pET32a表达质粒,原核表达及纯化重组蛋白.方法 将目的基因CFP10亚克隆到pET32a表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)plysS,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE检测其表达水平,经含Ni2+的His-bind树脂柱纯化CFP10.结果 菌落PCR鉴定及测序分析表明,成功构建CFP10/ pET32a重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的40%,占裂解物上清总蛋白的72.4%,表明重组的CFP10基因能在BL21中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶性状态存在.结论 成功构建结核分支杆菌CFP10/ pET32a重组质粒,CFP10获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨风琴		33	114	5.0	9.0
2	朱佳佳		12	22	3.0	4.0
3	丁淑琴		38	127	5.0	10.0
4	杨园园		5	3	1.0	1.0